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基因檢測(cè)技術(shù)論文

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  基因是DNA分子上的一個(gè)功能片段,是遺傳信息的基本單位,是決定一切生物物種最基本的因子;下面是學(xué)習(xí)啦小編整理了基因檢測(cè)技術(shù)論文,有興趣的親可以來(lái)閱讀一下!

  基因檢測(cè)技術(shù)論文篇一

  病毒基因的檢測(cè)

  【關(guān)鍵詞】 病毒基因 檢測(cè)

  一 乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)測(cè)定

  乙型肝炎是由乙肝病毒引起的以肝臟損害為主要臨床特征的急、慢性傳染病,嚴(yán)重者可 發(fā)展成慢性肝炎、肝硬化和肝癌。在我國(guó),乙肝是危害人類(lèi)健康的一種主要傳染病。

  【 參考值】

  陰性 (Taqman熒光定量PCR技術(shù))

  【臨床意義】

  1.HBV-DNA是乙型肝炎病毒感染的直接證據(jù),是HBV有活性復(fù)制能力及具傳染性的確切標(biāo)志。

  2.可定量檢測(cè)HBV-DNA含量,為臨床病情判斷、療效觀察提供信息。

  3.HBV-DNA的出現(xiàn)先于其他血清學(xué)指標(biāo)(如HBsAg),可早期診斷HBV感染。

  4.正常人HBV-DNA為陰性。當(dāng)HBV-DNA為101~104拷貝/ml時(shí),表明病毒復(fù)制水平低,傳染性較弱;而當(dāng) HBV-DNA>104拷貝/ml時(shí),表明病毒復(fù)制水平高,傳染性強(qiáng)。

  5.HBV-DNA含量測(cè)定可為臨床藥物選擇提供依據(jù)。

  【注意事項(xiàng)】

  1.標(biāo)本可用血清或血漿,避免肝素抗凝,避免反復(fù)凍融。

  2.標(biāo)本室溫放置不超過(guò)4小時(shí)。

  3.溶血、高膽紅素標(biāo)本影響檢測(cè)結(jié)果。

  二 其他病毒DNA測(cè)定

  (一)人乳頭瘤病毒DNA(HPV-DNA)檢查

  人乳頭瘤病毒是一種小的雙鏈DNA病毒,根據(jù)核酸相關(guān)性分型已發(fā)現(xiàn)70余型。該病毒可以感染人的皮膚和黏摸上皮細(xì)胞,誘發(fā)細(xì)胞增生,產(chǎn)生乳頭瘤樣病變。

  【參考值】

  陰性 (多重核酸熒光定量PCR技術(shù))

  【臨床意義】

  1.HPV難以用傳統(tǒng)的病毒培養(yǎng)及血清學(xué)技術(shù)檢測(cè),目前主要采用分子生物技術(shù)檢測(cè)HPV-DNA,靈敏度高。

  2.可對(duì)尿道、陰道、宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行人乳頭瘤病毒的檢測(cè)及分型,判斷體內(nèi)HPV感染狀況。

  3.HPV 6和11型與尖銳濕疣、喉頭鱗狀上皮乳頭狀瘤發(fā)生有關(guān);HPV 16、18、31、32型等與宮頸癌發(fā)生相關(guān)。因此,可用于對(duì)HPV高危亞型的診斷,對(duì)尖銳濕疣、宮頸癌等疾病的診斷與篩查具有重要意義。

  4.HPV-DNA檢測(cè)可用于考核療效與預(yù)后。

  【注意事項(xiàng)】

  1.用無(wú)菌拭子取尿道、陰道、宮頸分泌物于無(wú)菌試管或無(wú)菌瓶中。

  2.標(biāo)本采集應(yīng)嚴(yán)格按無(wú)菌操作,避免污染。并及時(shí)送檢。

  (二)人類(lèi)巨細(xì)胞病毒DNA(HCMV-DNA)檢查

  HCMV是皰疹病毒科成員,人類(lèi)普遍易感,多為隱性或潛伏感染。在免疫功能低下、缺陷或抑制情況下,可發(fā)生成人HCMV感染,常呈彌漫性病變,嚴(yán)重者甚至死亡。

  【參考值】

  陰性 (熒光探針雜交PCR技術(shù))

  【臨床意義】

  1.用于臨床HCMV感染的快速診斷。

  2.用于臨床免疫抑制 治療過(guò)程中體內(nèi)HCMV感染的快速診斷與療效監(jiān)測(cè)。獲得性免疫缺陷綜合征等患者HCMV感染的診斷與療效監(jiān)測(cè)。

  3.PCR技術(shù)檢測(cè)HCMV的敏感性高,且HCMV-DNA的出現(xiàn)早于臨床癥狀或血清學(xué)標(biāo)記物的出現(xiàn),可早期診斷 HCMV感染。

  4.妊娠早期感染HCMV可引起胎兒先天畸形,產(chǎn)前檢測(cè)HCMV-DNA有利于優(yōu)生優(yōu)育。

  5.連續(xù)監(jiān)測(cè)巨細(xì)胞病毒的含量變化可了解病毒的復(fù)制狀況,從而為疾病的早期診斷與藥物療效提供直接的病原學(xué)依據(jù)。

  【注意事項(xiàng)】

  采用EDTA抗凝全血或腦脊液標(biāo)本,采集后及時(shí)送檢。

  (三)單純皰疹病毒DNA(simplex herpes virus, HSV-DNA)

  單純皰疹病毒是一種有囊膜的雙股DNA病毒,分為I型和II型。近年來(lái),HSV是性傳播疾病、病毒性腦炎等疾病的重要病原體。

  【參考值】

  陰性 (熒光探針PCR技術(shù))

  【臨床意義】

  1.用于檢測(cè)人血清樣本或體液樣本中的單純皰疹病毒并可同時(shí)分型,輔助診斷HSV感染性疾病。

  2.HSV I型感染主要引起口唇皰疹、皰疹性結(jié)膜炎、腦炎和皮膚性皰疹,HSV II型主要引起生殖器皰疹, HSV-DNA檢測(cè)可輔助診斷上述疾病,并可用于考核療效與預(yù)后。 【注意事項(xiàng)】

  1.血清用無(wú)菌注射針頭抽取靜脈血2ml于無(wú)菌肝功管中。

  2.分泌物用無(wú)菌棉拭子采集標(biāo)本,女性取宮頸或陰道分泌物,男性取精液或前列腺液,將取樣后的棉拭子放入無(wú)菌試管或無(wú)菌瓶中。

  3.腦脊液抽取腦脊液于無(wú)菌玻璃瓶中。

  (四)EB病毒DNA(EB virus,EBV-DNA)

  EBV屬于丫皰疹病毒科,主要經(jīng)涎液傳播,PCR技術(shù)可靈敏地檢測(cè)出標(biāo)本中的EBV-DNA,滿(mǎn)足臨床診斷、 治療需要。

  【 參考值】

  陰性 (熒光探針雜交PCR技術(shù))

  【臨床意義】

  1.可快速檢測(cè)血液、腦脊液、組織、尿液中的EB病毒,為EB病毒感染提供直接證據(jù)。

  2.EB病毒臨床上與鼻咽癌傳染性單核細(xì)胞增多癥、霍奇金病等的發(fā)病密切相關(guān)。

  【注意事項(xiàng)】

  1.檢測(cè)標(biāo)本可采用EDTA抗凝全血、腦脊液、咽拭子、尿液、病變組織等。

  2.標(biāo)本采集時(shí)嚴(yán)格按無(wú)菌操作,并及時(shí)送檢。

  三 RNA病毒測(cè)定

  丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)檢測(cè)

  丙型肝炎病毒是一種單鏈正股RNA病毒,引起丙型病毒性肝炎。丙型病毒性肝炎多因輸血或血制品而引起,在輸血者中還存在無(wú)癥狀的HCV攜帶者。

  【參考值】

  陰性(RT-PCR,熒光定量PCR技術(shù))

  【臨床意義】

  1.有助于HCV感染的早期診斷。

  2.HCV-RNA陽(yáng)性提示HCV復(fù)制活躍,傳染性強(qiáng)。

  3.HCV-RNA轉(zhuǎn)陰提示HCV復(fù)制受抑,預(yù)后較好。

  4.連續(xù)觀察HCV-RNA,結(jié)合抗-HCV的動(dòng)態(tài)變化,可作為丙肝的預(yù)后判斷和干擾素等藥物療效的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

  【注意事項(xiàng)】

  1.標(biāo)本可用血清或血漿,用無(wú)菌注射針頭抽取靜脈血2~3ml于無(wú)菌肝功管或EDTA抗凝管中送檢。避免肝素抗凝,避免反復(fù)凍融。

  2.標(biāo)本室溫放置不超過(guò)4小時(shí)。

  3.溶血、高膽紅素標(biāo)本影響檢測(cè)結(jié)果。

  參 考 文 獻(xiàn)

  [1]楊振,祁自柏,李河民.病毒基因檢測(cè)技術(shù)的 發(fā)展趨勢(shì). 《 中國(guó)生物制品學(xué)雜志》,2006年01期.

  [2]徐麗.利用基因工程進(jìn)行PHB相關(guān)基因的克隆和煙草轉(zhuǎn)化[D].山東師范大學(xué),2000年.

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